化(hua)學發(fa)光(guang)/凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像的(de)四大定量(liang)關系(xi)

化(hua)學發(fa)光(guang)/凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像屬於(yu)高(gao)科(ke)技(ji)產品，是(shi)需要(yao)軟、硬件緊(jin)密壹(yi)致配合的(de)分(fen)子(zi)生(sheng)物分(fen)析儀(yi)器。化(hua)學發(fa)光(guang)/凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像系統(tong)可以(yi)應(ying)用(yong)於(yu)分(fen)子(zi)量(liang)計算(suan)、密(mi)度(du)掃(sao)描、密(mi)度(du)定量(liang)、PCR定量(liang)等生(sheng)物工程常規(gui)研(yan)究。

總(zong)體上(shang)來(lai)說化(hua)學發(fa)光(guang)/凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像系統(tong)可以(yi)用(yong)於(yu)：蛋(dan)白(bai)質、核(he)酸、多肽(tai)、氨基酸、多(duo)聚(ju)氨基(ji)酸(suan)等其他生(sheng)物分(fen)子(zi)的(de)分(fen)離(li)純化(hua)結果(guo)作(zuo)定性分(fen)析

（1）分(fen)子(zi)量(liang)定量(liang)

對於(yu)壹(yi)般常用(yong)的(de)DNA膠(jiao)片,利(li)用(yong)分(fen)子(zi)量(liang)定量(liang)功(gong)能(neng),通(tong)過對(dui)膠(jiao)上(shang)DNA Marker條(tiao)帶(dai)的(de)已知(zhi)分(fen)子(zi)量(liang)註釋,自動生(sheng)成(cheng)擬合曲線(xian),並(bing)以(yi)它(ta)衡(heng)量(liang)得到(dao)未(wei)知條(tiao)帶(dai)的(de)分(fen)子(zi)量(liang)。通(tong)過這(zhe)種(zhong)方法所得到的(de)結果(guo)較肉(rou)眼(yan)觀察估(gu)計要(yao)準確很多。

（2）密度(du)定量(liang)

壹般常用(yong)的(de)測定DNA(脫(tuo)氧(yang)核(he)糖核(he)酸)和(he)RNA(核(he)糖核(he)酸)濃度(du)的(de)方法是(shi)紫(zi)外吸(xi)收法,但(dan)它(ta)只(zhi)能(neng)測定樣(yang)品中的(de)總核(he)苷(gan)酸濃度(du),而不(bu)能(neng)區(qu)分(fen)各(ge)個(ge)長(chang)度片(pian)段的(de)濃度(du)。利用(yong)化(hua)學發(fa)光(guang)/凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像系統(tong)和(he)軟件,先(xian)將(jiang)DNA膠(jiao)片上(shang)某壹已知其DNA含量(liang)的(de)標準條(tiao)帶(dai)進行(xing)密度(du)標定以(yi)後,可以(yi)方便(bian)的(de)單擊其他未(wei)知條(tiao)帶(dai)，根據(ju)與(yu)已(yi)知(zhi)條(tiao)帶(dai)的(de)密度(du)做比較，可以(yi)得到未(wei)知DNA的(de)含量(liang)。此方法也適用(yong)於(yu)對(dui)PA GE蛋白(bai)膠(jiao)條(tiao)帶(dai)的(de)濃度(du)測定。

（3）密(mi)度(du)掃(sao)描

在(zai)分(fen)子(zi)生(sheng)物學和(he)生(sheng)物工程研(yan)究中(zhong),常用(yong)到(dao)的(de)是(shi)對(dui)蛋白(bai)表達(da)產物占(zhan)整(zheng)個(ge)菌體蛋(dan)白(bai)的(de)百分(fen)含量(liang)的(de)計算(suan)。傳(chuan)統(tong)的(de)方法是(shi)利(li)用(yong)的(de)密度(du)掃(sao)描,但(dan)利(li)用(yong)生(sheng)物分(fen)析軟(ruan)件結(jie)合現在(zai)實(shi)驗室常規(gui)配(pei)備的(de)掃(sao)描儀(yi)或者直(zhi)接用(yong)白(bai)光(guang)照(zhao)射(she)的(de)化(hua)學發(fa)光(guang)/凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像就能(neng)完(wan)成(cheng)此項工(gong)作(zuo)。

（4）PCR定量(liang)

PCR定量(liang)主要(yao)是(shi)指(zhi)，如(ru)果(guo)PCR實(shi)驗擴(kuo)增(zeng)出(chu)來(lai)的(de)條(tiao)帶(dai)不(bu)是(shi)壹(yi)條(tiao)，那(na)麽可以(yi)利用(yong)軟(ruan)件計(ji)算出(chu)各個(ge)條(tiao)帶(dai)占(zhan)總體條(tiao)帶(dai)的(de)相對(dui)百分(fen)數(shu)。就此功(gong)能(neng)而(er)言，與(yu)密(mi)度掃(sao)描類(lei)似，但(dan)實(shi)際(ji)在(zai)原(yuan)理上(shang)並不(bu)相(xiang)同(tong)。PCR定量(liang)是(shi)對(dui)選定的(de)幾條(tiao)帶(dai)進行(xing)相對(dui)密度定量(liang)並計(ji)算(suan)其占(zhan)總和(he)的(de)百分(fen)數(shu)，密(mi)度(du)掃(sao)描時(shi)並(bing)對(dui)選擇(ze)區(qu)域生(sheng)成(cheng)縱向(xiang)掃(sao)描曲(qu)線(xian)圖(tu)並積分(fen)。